SOP for fermentation tank cleaning

　　1、目的：建立发酵罐的清洗标准操作规程。

　　2、范围：适用于5L以上生物发酵罐。

　　4.1罐体的预清洗

　　4.1.1每一批发酵结束，放出物料。小心卸下pH和DO电极，用自来水将电极冲洗干净

　　4.1.2将罐上pH和DO电极插孔用少量自来水冲洗干净，后用配套活塞塞上，并用螺盖旋紧。

　　4.1.3对50L以下的罐体清洗需松掉上盖螺丝和各连接处，拆下发酵罐上盖，卸下接种帽、补料孔塞、消泡剂探头和各预留孔塞等，用抹布清洗擦试每个部件，用自来水冲干净。用软毛刷刷洗盖子、盖与罐体的接口处、罐内壁和搅拌机封处，用自来水冲尽残渣和残液，冲洗时要用水桶收集冲洗水。检查皮圈并用抹布清洗干净(如有老化，及时更换并记录)，然后依次将部件配好，将发酵罐盖上，对称旋紧固定螺钉，通空气保压检查密封性，如有漏气及时卸压，并检查漏气的地方进行处理和解决。并将操作内容记录。

　　4.1.4对50L以上的罐体清洗需松掉投料盖，接种帽、补料孔塞、消泡剂探头和各预留孔塞等，用抹布清洗擦试每个部件，用自来水冲干净。打开电源视灯，检查罐体内壁有无大块的渣等杂物存在，如果有，用专用的工具将杂物取出。用软毛刷刷洗盖子内壁、盖与罐体的接口处、罐内壁和搅拌机封处，用自来水冲尽残渣和残液，冲洗时要用水桶收集冲洗水。检查皮圈并清洗干净(如有老化，及时更换)，然后依次将部件配好，通空气保压检查密封性，如有漏气及时卸压，并检查漏气的地方进行处理和解决。并将操作内容记录。

　　4.2碱洗

　　4.2.1预清洗检查完毕，泄压后，打开进料口，用清水将发酵罐注满。估算加水体积进行记录。

　　4.2.2按每升洗水加入NaOH片碱10克或NaOH工业碱25毫升，按实进行记录。关闭进料口，开启搅拌，转速300rpm，搅拌均匀后，用夹套升温至90-95℃，保温1h。将操作内容记录在清洗表格中。

　　4.2.3冷却至50℃以下时，将罐内碱液从底阀排出。用有盖的塑料桶先把碱液蓄好，以备回收甲醛。

　　4.2.4用足够的自来水冲洗罐内残留的碱，直至流出的冲洗液PH为中性为止。将操作内容记录在清洗表格中。

　　4.3甲醛熏蒸

　　4.3.1碱洗后按下列程序熏蒸一次。此步骤适用染菌发酵罐批碱洗后，适用正常发酵第10批碱洗后，适用发酵罐停用一个月以上恢复使用时。如果要清洗时，在表格中“否”的位置打勾，并做好相关记录。否则在表格中“是”的位置打勾，跳过此步操作。

　　4.3.2尾气装置的安装：将排气口、取样口、放料口阀门连上塑胶管，塑胶管直通尾气瓶，瓶内装满三分之二的1%碱液(可采用4.1.5中所述的回收碱液)。

　　4.3.3碱洗完成后，关闭罐体底阀，然后往罐内加入自来水覆盖掉罐内的蒸汽管出口即可，每10L体积的发酵罐加入37%的工业甲醛50mL，记录甲醛用量关闭投料口，注意接好尾气装置(甲醛有毒，避免吸入)，缓慢搅拌使溶液均匀，转速100rpm。

　　4.3.4往发酵罐内直通蒸汽升温至90-95℃关闭蒸汽阀门，密闭保温30分钟，注意发酵罐不要超温和超压。后打开排气阀一点点，通蒸汽到100℃保温30分钟，排出的蒸汽收集在尾气瓶里。

　　4.3.5保温完毕后，关闭蒸汽进阀门，缓慢从排气口泄罐压，保持尾气装置。

　　4.3.6用自来水冲洗发酵罐内壁，从发酵罐底阀排干发酵罐，关闭发酵罐所有的进出口阀门。

　　4.4空罐灭菌

　　4.4.1缓慢往发酵罐内直通蒸汽，控制发酵罐的排气阀门，保持罐压在0.11mpa，升温至121℃，并保温1小时。

　　4.4.2保温完毕后，关闭蒸汽，从排气口泄罐压(保持尾气装置)，卸压完毕保持排气阀门开着。

　　4.4.3用夹套冷水冷却发酵罐，拆掉尾气装置。从出料阀放干净罐体内的冷凝水。

　　4.4.4接下来可以进行发酵操作。